賽默飛BCA蛋白定量試劑盒說明書

一、 核心優勢：為什么選擇賽默飛的BCA試劑盒？

與傳統的Bradford法或Lowry法相比，賽默飛的BCA試劑盒具備多項滿足現代實驗室需求的突出優勢：

1. 更廣泛的兼容性：對樣品中常見濃度的去垢劑（如SDS、Triton X-100） 和還原劑（如DTT、β-巰基乙醇） 具有更強的耐受性，顯著減少了樣品制備帶來的干擾。

2. 更高的靈敏度與更寬的線性范圍：檢測范圍通常可達20-2000 μg/mL，標準曲線線性優異（R² > 0.99），既能檢測微量樣品，也能準確定量高濃度樣本，無需頻繁稀釋。

3. 出色的穩定性：顯色反應完成后，吸光度在室溫下可穩定數小時，特別適合高通量96孔板操作，無需緊張地即時讀數。

4. 靈活的操作形式：提供微孔板法和試管法兩種標準操作程序，適配不同通量和儀器需求。

二、 產品核心信息與實驗方案

賽默飛提供多種規格的BCA試劑盒（如貨號23225、23227等），經典套裝通常包含以下組分：

標準操作流程（微孔板法）：

工作液配制：按50:1的體積比混合試劑A與試劑B，充分混勻。此工作液室溫下可穩定24小時。

繪制標準曲線：用與樣品相同的緩沖液，將蛋白標準品梯度稀釋為一系列已知濃度（如0, 125, 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000 μg/mL）。

加樣與反應：在微孔板中分別加入標準品和待測樣品（通常25 μL），再加入200 μL BCA工作液，輕輕震蕩混勻。

孵育與測定：蓋上板蓋，于37°C孵育30分鐘，或60°C孵育15分鐘（高溫可提高靈敏度）。隨后在酶標儀上測定562 nm處的吸光度值。

計算濃度：根據標準曲線和樣品吸光度值，計算未知樣品的蛋白濃度。

三、 關鍵技巧與注意事項

為了獲得可靠的數據，以下幾點至關重要：

1. 標準曲線是關鍵：每次實驗都必須制作新鮮的標準曲線，且標準品與待測樣品的基質（緩沖液成分）應盡可能一致。

2. 控制孵育溫度與時間：孵育時間和溫度直接影響顯色深度，需確保所有孔的反應條件一致。推薦使用恒溫孵育器而非室溫放置。

3. 樣品顏色干擾：如果樣品本身有顏色，需設置樣品背景對照孔（用PBS代替BCA工作液），在最終計算時扣除背景值。

4. 數據有效性判斷：樣品的吸光度值應落在標準曲線的線性區間內。若超出范圍，需對樣品進行適當稀釋后重新測定。

四、 典型應用場景

1. 蛋白純化過程監控：快速測定洗脫組分中的蛋白濃度，繪制純化圖譜。

2. 細胞與組織裂解液定量：為Western Blot等實驗進行上樣量均一化。

3. 抗體濃度測定：用于雜交瘤上清或純化后抗體的初步定量。

4. 藥物研發與質量控制：在生物制藥工藝中監測蛋白表達量與產物濃度。

賽默飛代理——北京百奧創新科技有限公司，提供賽默飛BCA蛋白定量試劑盒等產品。

北京百奧創新科技有限公司是中關村高新技術企業，于2017年在北京成立。百奧創新在產品自主研發的同時，也與全球多家生命科學試劑供應商建立良好的合作關系，基于“客戶第一”的核心理念，向全國10000+客戶提供200000+優質產品。公司以北京運營中心為主體，在天津、上海、浙江、江蘇、廣州、深圳、武漢、成都、重慶等地建立辦事處及聯絡中心，并建有北京、天津、深圳三大專業化庫存與物流基地，以更好地服務全國客戶。