碧云天總SOD活性檢測試劑盒(S0101S)產品介紹

碧云天總SOD活性檢測試劑盒(S0101S)是一種基于WST-8的顯色反應，通過比色來檢測細胞、組織或其它樣品中SOD即超氧化物歧化酶活性的試劑盒。

目前測SOD 活性測定法有多種，最初的核黃素法、到 NBT(氮藍四唑)法，NBT產生的甲臜染料水溶性差，易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率達不到 100%等，從而使檢測的靈敏度和精確度受到影響；本試劑盒采用的是目前穩定性更好、靈敏度更高的改性WST法即 WST-8法，改性的 WST 可以和黃嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化產生的超氧化物陰離子(O 2 .- )反應產生水溶性的甲臜染料，后者在 450nm 處有最大吸收。

使用說明：

1.樣品的準備：

細胞樣品的準備：對于貼壁細胞，吸凈細胞培養液，用4℃或冰浴預冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍，按照每100萬細胞加入100-200微升的比例加入本試劑盒提供的SOD樣品制備液，適當吹打以充分裂解細胞；對于懸浮細胞，600g離心5分鐘收集細胞，用4℃或冰浴預冷的PBS或生理鹽水洗滌一遍，按照每100萬細胞加入100-200微升的比例加入SOD樣品制備液，適當吹打，以充分裂解細胞。4℃約12,000g離心3-5分鐘，取上清作為待測樣品。

2.試劑盒的準備工作：

WST-8/酶工作液的配制：按照每個反應160μl的體積配制適量的WST-8/酶工作液。均勻混合151μl SOD檢測緩沖液、8μl WST-8和1μl酶溶液，即可配制成160μl WST-8/酶工作液。根據待檢測樣品(包括標準品)的數量，配制適量的WST-8/酶工作液。配制好的WST-8/酶工作液4℃或冰浴保存，可以在當天使用，但建議盡量現配現用。

3.樣品測定：

使用96孔板設置樣品孔和各種空白對照孔。依次加入待測樣品和其它各種溶液。加入反應啟動工作液后充分混勻。注意：加入反應啟動工作液后反應即會開始，可以在低溫操作或用排槍操作以減小各孔間因加入反應啟動工作液的時間先后差異而導致的誤差。

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