Elabscience MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒怎么用？

Elabscience MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)。那么你知道Elabscience MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒該怎么用嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

1. 準(zhǔn)備工作

本試劑盒中 MTT (5×)為濃縮液，實(shí)驗(yàn)前稀釋成 1×工作液。例如：取 100 μL MTT (5×)，加入 400 μL

MTT Diluent Buffer，混勻后即為1×MTT 工作液。

2. 取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度，按每孔100 μL 細(xì)胞懸液接種于96 孔板中，同時(shí)設(shè)空白孔（不加細(xì)胞但是加入同體積的培養(yǎng)基）。

注：通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100 μL約含2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100 μL約含5000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。

3. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和處理。

4. 每孔加入 50 μL 的 1×MTT 工作液。繼續(xù)孵育 1~4 h，使 MTT 還原為甲臜。

注：MTT孵育條件與細(xì)胞培養(yǎng)條件相同。

5. 小心吸出上清液，每孔加入 150 μL 的 DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

6. 用酶標(biāo)儀測(cè)定在 570 nm 處的吸光度。

7. 結(jié)果計(jì)算

[注]:

ODsample: 實(shí)驗(yàn)孔的OD值

ODcontrol: 對(duì)照孔的OD值

ODblank: 空白孔的OD值

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