如何提高DNA純度測定的準確性？

分子生物學實驗中經常需要對樣本進行濃度和純度的測定，它相當于一種質控，以此來確保下游實驗的結果可靠。那么該如何提高DNA純度測定的準確性呢？讓我們一起來看看吧！

常用的DNA濃度/純度測定設備是紫外分光光度計，它的原理是利用物質分子對紫外可見光譜區的輻射吸收來進行分析物質成分。假設現在有一樣物質A，它溶解在溶液內，當光照射溶液時，溶液內的A會吸收一部分的光。不同顏色的光有不同的波長，A對不同顏色的光（不同波長）的吸收程度是不一樣的。

雙鏈的DNA，它能對波長為260nm的光進行強烈的吸收，吸收的程度可以用一個叫吸光度的數值來測量，濃度越高的DNA，理論上吸光度也越高。

最后，通過與標準品的吸光度數值對比后，就可以知道未知濃度的DNA有多少量了。

DNA濃度測定通常會使用紫外分光光度計，常見的有NanoDrop這類設備。除了DNA，它還能測定RNA和蛋白的吸光度。

要提高濃度測定的準確性，需要注意以下幾點：

1. 檢測之前，務必充分混勻DNA溶液，因為這類機器的上樣檢測體積只需要1-2uL，如果樣品沒有混勻，那么每次檢測樣品濃度也會不一樣。

2. 因為上樣體積很小，所以樣品很容易揮發，如果把樣品加在檢測基座后不馬上檢測的話，會導致測出來的樣品濃度偏高。

3. 實驗環境和耗材的穩定性要高。檢測設備應該在放置在溫度可控、通風的環境下；裝樣品的管子如果不是要進行吸取樣品操作的話，需要時刻緊閉。

4. 每次檢測完畢，都需要對檢測基座或者比色皿進行清洗和擦拭，確保不會有樣品殘留后，再進行下一次上樣檢測。

5. 空白調零，應該使用溶解待檢測樣品的溶液來調零。例如如果用水溶解DNA，那就用水調零，用其他緩沖液溶解，則用對應的緩沖液調零。

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