關于血清的這些知識，你了解嗎？

• 什么是血清

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。

• 血清在細胞培養中的作用

血清的成分多樣，可以給細胞提供：

1. 基本營養物質，如氨基酸、維生素、脂類物質、無機物、核酸衍生物等細胞生長必需的物質；

2. 激素：胰島素、促生長激素、類固醇激素如睪酮和孕酮、腎上腺皮質激素如地塞米松等。

3. 生長因子：表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、血小板生長因子、神經細胞生長因子等；

4. 結合蛋白：結合蛋白在細胞代謝過程中起著重要作用，它能攜帶重要地低分子量物質，如轉鐵蛋白結合鐵離子，白蛋白攜帶維生素、激素等；

5. 促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷；

6. 蛋白酶抑制劑：中和某些細胞(如內皮細胞等)釋放的蛋白酶，從而對培養中的細胞起到某些保護作用；

7.血清含有的一些微量元素和離子在代謝解毒中起重要作用，如SeO₃，硒等；

8.血清蛋白使血清具有一定的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，如懸浮培養攪拌時保護細胞。

• 常用的血清

目前常用的血清有胎牛血清、新生牛血清和小牛血清。

以上三種血清中胎牛血清的品質ZUI高，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少，因此價格也最高。

• 血清的使用與選擇

血清的使用濃度一般在5%~20%，常用是10%。

有些細胞需要胎牛血清才能生長，而有些細胞有小牛血清就能生長。因此，要根據具體用途與需要選擇合適的血清。

• 血清的儲存與解凍

1.儲存：建議將血清儲存在-5℃~-20℃（HyClone胎牛血清建議儲存在-10℃）。注意：建議不要將血清儲存在-80℃中！（因為儲存在-80℃，解凍時巨大的溫差會使血清產生更多的沉淀。）

2.解凍：不建議于4℃過夜解凍，也不建議直接將冷凍的血清放在37℃水浴或者溫箱中解凍，因為若血清沒有混勻，底部的蛋白會變性形成沉淀。

血清解凍的方法（三步法）如下：

注：在水浴過程中，血清要*浸入水中，同時在融化過程中要慢慢搖動瓶身混勻血清，但在搖動中盡量不要產生泡沫。

血清在解凍后，可以根據實驗需求分裝成單次用量，密封好后立即放回-20℃冰箱繼續儲存以供進一步使用，這樣可以有效避免反復凍融的問題。

• 血清出現沉淀或絮狀物質的原因

1. 2-8℃長時間儲存。

2. 解凍過程中未混勻。

3. γ-輻照：不會損害血清的理化特性或細胞培養性能。

4. 反復凍融：使血清脂蛋白發生變性造成渾濁。

5. 血清中殘留的纖維蛋白原：殘留的纖維蛋白原在解凍后會轉化為纖維蛋白，過量的纖維蛋白在血清中表現為可見的絮狀物質。

去除方法：400 g離心。不建議直接過濾血清以去除絮狀物質，因為過濾器可能會堵塞或者截留重要的蛋白質。

6. 磷酸鈣：磷酸鈣在血清中通常呈云狀，并且在倒置顯微鏡下觀察會看到可以自由移動的小黑點，因此磷酸鈣沉淀通常被誤認為是微生物污染物。

檢測是否污染方法：將1 mL待測血清直接倒在細菌瓊脂平板上，在37℃培養之后觀察菌落的生長情況。在油鏡（放大1000倍）下觀察革蘭氏染色，以確定是否受到污染。不建議用37℃孵育的血清直接檢測無菌性，因為在37℃孵育之后，血清中的磷酸鈣沉淀物會增加。

• 國內購買胎牛血清的現狀

難辨真假，產地不實，有的甚至都不是牛血清。非正規胎牛血清產品會直接影響實驗的結果和穩定以及數據的真實性，對實驗造成很大的影響。因此，購買血清產品時一定要選擇可靠的產品！

北京百奧創新科技有限公司提供來源可靠，產地可查的HyClone、Omnimabs以及澳申生物的血清產品。

• HyClone新西蘭源胎牛血清產品優勢：

1.「真混合」生產工藝，確保批內一致性；

2.采用一次性生產設施，*消除了交叉污染的風險；

3.最DA的批處理能力，降低批間差異造成的影響；

4.完整的來源地可追溯性；

5.低抗體含量，高生長因子；

6. Oritain^TM天然品指紋識別技術；

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